人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒操作程序洗板方法
品牌:RENJIEBIO
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
保存:2-8℃,避光保存
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨供應
有效期:六個月
注:僅用于科研,不得用于臨床診斷
常見問題
ELISA操作注意事項如下:(1) 加樣:在ELISA中除了包被外,一般需進行4~5次加樣。在定性測定中有時不強調(diào)加樣量的準確性,例如規(guī)定為加樣1滴。此時應該使用相同口徑的滴管,保持準確的加樣姿勢,使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應力求準確。標本和結(jié)合物的稀釋液應按規(guī)定配制。加樣時應將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現(xiàn)氣泡。(2) 孵育:在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加結(jié)合物后,此時反應的溫度和時間應按規(guī)定的要求,保溫容器水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)⑵桨宸旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應該是金屬的,傳熱容易。如用保溫箱,空濕盒應預先放在其中,以平衡溫度,這一步驟在室溫較低時更為重要。加入底物后,反應時間和溫度通常不做嚴格要求。(3) 洗滌:洗滌在ELISA過程中雖不是反應步驟,但卻是決定成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。(4)顯色及終止反應:顯色是酶促反應,應按規(guī)定的溫度和時間操作,用酸終止。(5) 結(jié)果判斷:用比色計測定結(jié)果,準確性決定于ELISA板底的平整與透明度和比色計的質(zhì)量。
組成及試劑配制
1:預包被板: 96T/48T
2:酶標記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標準品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
操作說明:1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)
客戶常見問題解析:
1、代測收費情況?幫忙處理標本收費嗎?
答:客戶購買我們的試劑盒的前提下,代測服務是免費,只收取試劑盒費用;老師的樣本也是免費處理的。
2、不同批的試劑能不能用?
答:同樣的盒子不同的批號或是同一個批號,也是不建議混用的,同樣的盒子,分兩次的結(jié)果應該是不一樣的,但數(shù)據(jù)部應相差太大 應在可控制或接受范圍,不同批號的不可以混用 原因很簡單若不同批號的混用的話 可能得出的結(jié)果不是您想要的 數(shù)據(jù)可能偏差較大
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